Cơ chế tác động của hỗn hợp Trimethoprim và Sufamethoxazole là:

Ức chế Dihydrofolate reductase ở vi khuẩn --> Không hình thành vòng purine --> Không nguyên liệu cho ADN và ARN. (cũng có tác động tới con người nên cẩn thận)